復方心腦腎康防治心肌缺血損傷功效研究

　　1 材料與儀器

　　1.1 藥物復方心腦腎康（XNSK）由本課題組研制，已通過急毒和長毒實驗，組方中各活性提取物均購自成都華高天然藥物有限公司，包括TP（純度98%批號：20031108），Egb761（總黃酮/總內酯≥24:6,批號：20030710），PNS（純度90%,批號：20030911），丹參水溶性提取物（3%RS,批號：20030815），以上各成分按一定比例配成復方；復方丹參片（FFDS）： 安徽華佗國藥廠，批號：Z34020961。

　　1.2 試劑MDA，SOD，ROS，NOS，ATPase，考馬斯亮藍試劑盒，均為南京建成生物工程研究所產品。

　　1.3 儀器DH-1型動物人工呼吸機，722N紫外分光光度計，高速冷凍離心機。

　　2 方法

　　2.1 分組及給藥將動物隨機分為假手術組，缺血模型對照組，XNSK低、中、高劑量組，陽性對照組共6組，各組均于術前10 d開始灌胃給藥，1次/d（假手術組和缺血模型對照組給予同體積的生理鹽水），術前禁食12 h,第10天最后1次于缺血前60 min給藥，參考文獻方法［1］制備MIR模型。再灌注 60 min后各組動物實驗完畢，摘除部分結扎線以下左心室心肌，冰浴中制備成10%的組織勻漿，按試劑盒說明書，測定各組心肌MDA，SOD，ROS，NOS，ATP酶的含量。部分心肌用10%甲醛溶液固定，制成石蠟切片，蘇木素－伊紅（HE）染色，病理圖像分析儀下觀察。

　　2.2 統計方法實驗數據用 ±s 表示，采用SPSS13.0統計軟件，結果進行t檢驗。

　　3 結果

　　3個劑量的XNSK用藥后均使大鼠的心肌組織MDA的含量及ROS，NOS活性顯著降低，SOD和ATP酶活性顯著升高（P<0.05），高劑量組的保護作用強度優于FFDS組（P<0.05）。由圖1～3看出，缺血模型對照組心肌排列紊亂，細胞腫脹明顯，肌纖維部分斷裂，可見心肌細胞成片狀壞死，壞死區細胞核碎裂或崩解，周圍有炎性細胞浸潤。高劑量XNSK組心肌細胞排列規整，部分心肌細胞水腫變性，可見點狀的心肌細胞壞死，未見成片狀壞死，周圍有少量炎性細胞浸潤。陽性對照組心肌受損程度與中劑量XNSK 組相近。本研究實驗結果表明，對大鼠急性心肌缺血再灌注損傷的保護作用比復方丹參片更強，并有顯著性差異且毒副作用小，有望開發成為一種防治心肌缺血損傷的新藥，給臨床的治療提供了一種選擇。

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